介紹

Zell Shield?是一種即用型高濃度新型復(fù)合抗生素，無細胞毒性，通過阻止原核生物DNA及蛋白的合成，有效地祛除細胞培養(yǎng)中遇到的支原體、細菌、霉菌和酵母污染。Zell Shield?可常規(guī)添加到培養(yǎng)基中，保護細胞免受支原體的污染。

特點

1. 高效廣譜
祛除支原體效果明顯，同時，對細胞內(nèi)外的革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、病原蟲、霉菌和酵母等污染亦可有效預(yù)防。

2. 無細胞毒性
Zell Shield?對大多數(shù)細胞株都不會產(chǎn)生細胞毒性。

3. 抗支原體活性穩(wěn)定
在細胞培養(yǎng)期內(nèi)，Zell Shield?始終保持穩(wěn)定的活性。

4. 操作簡便

即用型，直接加入到培養(yǎng)基中。

使用方法

該產(chǎn)品為無菌溶液，100倍濃縮。1瓶（50mL）Zell Shield^?足夠供5L培養(yǎng)基使用（500ml培養(yǎng)基添加5ml Zell Shield^?，再混勻）。

Zell Shield^?可直接添加到任何動物細胞培養(yǎng)基中，37℃孵育7天后需更換，以達到最大的防護效果。

支原體污染祛除方法

據(jù)研究表明，約98％的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。支原體直徑約180~350nm，比細胞小很多，經(jīng)低速離心與細胞分離。通過反復(fù)懸浮沖洗、離心，加上使用Zell Shield?，即可在細胞培養(yǎng)四代以內(nèi)有效地祛除支原體。

1.首先把被支原體污染的細胞消化下來，放入離心管離心，棄上清。再加入干凈的PBS懸浮沖洗細胞、低速離心（300~500r/min）、棄上清，反復(fù)三次。這樣可祛除細胞表面60％~70％的支原體，支原體還剩約30％~40％。

2.細胞加入含1％Zell Shield?的新鮮培養(yǎng)基，傳代培養(yǎng)。這時因培養(yǎng)基中Zell Shield?的抑制作用，細胞培養(yǎng)過程中，雖然細胞增殖，但殘留的支原體無法增殖。細胞需再次傳代時，把第二代細胞消化下來，離心，棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清，反復(fù)三次。這時，細胞上殘留的支原體大約已剩余為最初污染量的10％左右。

3.細胞加入含1％Zell Shield?的新鮮培養(yǎng)基，傳代培養(yǎng)。需再次傳代時，把第三代細胞消化下來，離心，棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清，反復(fù)三次，可再次祛除60％~70％的殘余支原體。通過沖洗、抑制、換液等操作，細胞中支原體的殘留污染量大約只剩3％左右。

4.細胞加入含1％Zell Shield?的新鮮培養(yǎng)基，傳代培養(yǎng)。需再次傳代時把第四代細胞消化下來，離心，棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清，反復(fù)三次，可再次祛除60％~70％的支原體。此時，支原體殘留量大約已低于1％。

支原體的增殖亦有密度要求，用Zell Shield?處理過四代的細胞，即便撤掉Zell Shield?，只要保證沒有新的支原體人為再次帶入，原有支原體也無法再增殖。隨著傳代，換液，支原體的老化、死亡，細胞中的支原體污染基本就徹底解決了。

要點歸納：

1.每次傳代時，重復(fù)三次對細胞懸浮沖洗步驟非常重要，操作要正確、規(guī)范，以達最佳效果！

2.在培養(yǎng)基中加入1％Zell Shield?，抑制支原體增殖！

3.使用安全的血清、培養(yǎng)基等試劑，不再有新的支原體加入！

做到以上三點即可確保祛除支原體污染。